1993年，她凭借模特身份在电视剧《中国模特》中扮演了女主角丹娅。

1998年，苏瑾参加广州“美在花城”广告新星大赛；此时，她被赵宝刚导演选为电视剧《永不瞑目》的女主角，非科班出身的她在剧中饰演女刑警欧庆春，善良正义，然而对爱情的犹豫使她内心充斥着矛盾痛苦，拍摄时经常会有哭戏；该剧是她演艺生涯真正意义上的第一部作品，她也凭借“欧庆春”一角获得第18届中国电视金鹰奖最受观众喜爱女主角奖。

2001年5月，在情感剧《危险真情》中饰演单亲妈妈梅子；11月，出演由关锦鹏执导的同性爱情电影《蓝宇》，饰演陈捍东的妻子林静平，高贵抑郁，随后获得第21届香港电影金像奖最佳女配角提名；还在刑侦情感剧《梦断天国》中与张丰毅共同演绎一段令人柔肠百转的爱情悲剧。

2002年，出演了古天乐、关之琳等人主演的都市爱情喜剧电影《绝世宝贝》。

2003年，在其主演的古装电视剧《窦娥冤》中饰演窦娥；10月，主演谍战悬疑剧《梅花档案》，在剧中饰演狠手辣女特务南云，在剧中还首次裸镜演出；还与刘烨、林嘉欣共同出演香港爱情电影《恋之风景》，饰演一个与她性格反差很大的都市女孩张童。

2004年，先主演了警察题材电视剧《较量》，分别饰演刑警队长常军的青梅竹马恋人秦瑞、罪犯罗伟强的前妻，单纯善良、情感曲折；之后与陈宝国共同主演反贪题材电视剧《红罂粟》，饰演女检察官张颖，成熟优雅、正义机智；随后，还主演了情感剧《银杏飘落》，饰演女知青詹华，在苦海中备受煎熬、忍辱负重而又自强自立；

2006年，主演了中美合拍的动作悬疑电影《双镖》，分别饰演孪生姐妹，姐姐梅美心狠手辣，妹妹梅丽表面柔弱却功于心计，这是她首次拍摄纯英语片，而且是首次拍动作片；

2007年，携手李亚鹏主演悬疑电视剧《目击者》，饰演不择手段复仇冷艳女医生心雨；还在海归题材电视剧《故乡的云》中担任女主角方勤，是个随老公回国创业的知性女性；之后与张涵予共同出演应急题材电视剧《非常24小时第三部》，饰演地方应急指挥中心医务主管艾华。

2009年12月，主演的纪念澳门回归十周年的抗战剧《东方卡萨布兰卡》在央视播出，在剧中饰演了日本女间谍神尾关悦，外表冷酷惊艳，内心极其矛盾，在剧中还演绎了一段复杂爱情故事。

2011年12月，出演女性抗战剧《杀狼花》，饰演“杀狼花”中的大姐大江秋宁，心思缜密、内敛沉稳，以非凡的勇气和智慧对抗日寇。

2013年12月，出演了由鲍起静、于荣光主演的都市情感轻喜剧《劝和小组》，在剧中饰演于荣光前妻夏君宜，知性美丽、独立自强。

2014年5月7月，客串出演贾乃亮、李小璐主演的都市情感剧《产科男医生》；6月，出演以公益、儿童为题材的中国首部儿童音乐舞蹈电影《情笛之爱》；12月31日，与梁家辉、林志玲等人出演谍战悬疑电影《谁是卧底之王牌》，饰演施敬东，在片中被抓入狱受到“精神折磨”。